与多克隆抗体不同,单克隆抗体对抗原上的单个表位具有特异性, 哪些是针对抗原不同表位的抗体的混合物. 单克隆抗体的这种特异性使研究人员能够探测到该抗原表位,即使该抗原表位的变化非常细微——有时只有单个氨基酸的变化那么小. 单克隆抗体的一个主要优点是它们是由杂交瘤或重组细胞系产生的, 这些具有相同特异性和结构的抗体将会无限供应.
Labcorp利用两种不同的技术产生单克隆抗体:杂交瘤和b细胞克隆. 用于杂交瘤技术, 当检测到足够的免疫反应时,用抗原对啮齿动物进行免疫, 产生抗体的细胞与骨髓瘤细胞系融合并筛选. 另外, b细胞克隆, 筛选免疫动物脾细胞,在选定的b细胞中克隆表达重链和轻链基因. 这两种技术都提供了产生几乎无限的具有相同性质的抗体的机会.
杂种细胞生成
- 啮齿动物宿主种类
- 用于融合的脾细胞和/或淋巴结
- 各种熔融程序,如聚乙二醇(PEG)或电熔
b细胞克隆
- 几乎所有的宿主物种
- 抗原特异性b细胞的FACS分离
- 重链和轻链基因的克隆
- 在哺乳动物载体中的表达和稳定的细胞生成
抗体纯化及鉴定
- 扩大:
- 腹水或 在体外 方法
- 支原体检测,同型
- 细胞库/杂交瘤细胞系的储存
- 哺乳动物载体的瞬时转染